菌種-20度冰箱保存多久
博禾醫(yī)生
菌種在零下20度冰箱中通??杀4?-3年,實(shí)際保存時(shí)間與菌種類型、凍存保護(hù)劑、包裝密封性、溫度穩(wěn)定性及復(fù)蘇操作等因素有關(guān)。
不同微生物對(duì)低溫耐受性差異顯著。乳酸桿菌等益生菌通常可保存1-2年,而放線菌、芽孢桿菌等耐寒菌株可達(dá)3年以上。脆弱菌種如雙歧桿菌存活期可能縮短至6-12個(gè)月。
添加甘油終濃度15-20%或脫脂牛奶10-20%可形成冰晶保護(hù)層。二甲基亞砜DMSO適用于真菌保存,海藻糖能顯著提升革蘭氏陰性菌的復(fù)蘇率。
需使用專用凍存管并嚴(yán)格排除空氣。雙層密封可防止冷凍升華,真空包裝能使保存期延長(zhǎng)30%。玻璃安瓿瓶密封性優(yōu)于塑料凍存管。
頻繁開閉冰箱會(huì)導(dǎo)致溫度波動(dòng),日均溫差超過5℃會(huì)加速菌種失活。建議單獨(dú)存放于風(fēng)冷式冰箱深層,配備溫度報(bào)警裝置。
快速37℃水浴復(fù)蘇可減少冰晶損傷。采用梯度復(fù)溫法先4℃解凍2小時(shí)能提高古菌存活率,嚴(yán)格避免反復(fù)凍融。
長(zhǎng)期保存建議每6個(gè)月進(jìn)行活力檢測(cè),采用麥康凱平板或液體培養(yǎng)基驗(yàn)證存活率。重要菌株應(yīng)分裝多管保存,避免交叉污染。運(yùn)輸時(shí)使用干冰維持低溫鏈,實(shí)驗(yàn)室菌種庫需建立電子化管理系統(tǒng)記錄保存時(shí)間與傳代次數(shù)。日常維護(hù)需定期清理冰箱冰霜,放置溫度記錄儀監(jiān)測(cè)穩(wěn)定性。對(duì)于科研用標(biāo)準(zhǔn)菌株,建議采用液氮超低溫保存延長(zhǎng)至5年以上。
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