冰凍切片-20可以保存多久
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冰凍切片在-20℃條件下保存時間受樣本類型、保存方式等因素影響,通??杀4?-3個月。
組織樣本中脂肪含量較高的腦、乳腺等標(biāo)本在-20℃保存時易發(fā)生脂質(zhì)氧化,建議1個月內(nèi)使用;肌肉、肝臟等低脂組織可保存2-3個月。RNA易降解的樣本需添加RNA穩(wěn)定劑,最長保存期縮短至2周。
真空密封的切片保存期可達(dá)3個月,普通密封袋保存建議不超過2個月。使用防凍管裝載切片時需確保管內(nèi)無氣泡,密封不良的樣本易產(chǎn)生冰晶損傷,保存期限減半。
頻繁開關(guān)冰箱導(dǎo)致溫度波動會加速樣本劣化,日均開門超過3次的冰箱內(nèi)切片保存期縮短30%。建議單獨配備備用冰箱,溫度記錄儀顯示波動超過±5℃時需提前使用樣本。
添加10%二甲基亞砜DMSO的切片可延長保存期至3個月,甘油保護劑適用于免疫組化樣本但會干擾質(zhì)譜檢測。商業(yè)凍存液如CryoStor系列可使某些組織保存期延長20%。
反復(fù)凍融會顯著降低保存期限,每增加1次凍融循環(huán)保存期縮短7天。建議分裝為單次用量,37℃水浴復(fù)溫需控制在3分鐘內(nèi),室溫自然解凍會導(dǎo)致蛋白變性。
日常保存需定期檢查冰箱運行狀態(tài),每月清理霜凍。配套使用-80℃超低溫冰箱可延長保存期至6個月,重要樣本建議備份存儲。操作時佩戴防凍手套避免直接接觸冷凍切片,轉(zhuǎn)運過程使用干冰維持低溫。飲食方面多攝入維生素E可減緩凍存組織氧化,適度運動增強操作者抗寒能力。
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