結(jié)核菌素試驗皮試液的配制方法主要有標準稀釋法、定量稀釋法、無菌操作法、濃度校準法和分裝保存法。
1、標準稀釋法:
采用專用稀釋液將結(jié)核菌素純蛋白衍生物按比例稀釋至5國際單位/毫升的標準濃度。操作需在生物安全柜內(nèi)完成,使用經(jīng)滅菌處理的生理鹽水作為溶劑,嚴格遵循1:2000的稀釋比例,確保每0.1毫升含5國際單位結(jié)核菌素。
2、定量稀釋法:
通過精密移液器進行梯度稀釋,需進行三次重復(fù)定量驗證。每次稀釋后需靜置15分鐘使溶液充分混勻,使用漩渦振蕩器輔助分散抗原,最終稀釋誤差應(yīng)控制在±5%范圍內(nèi)。
3、無菌操作法:
全過程需在萬級潔凈環(huán)境下操作,使用一次性無菌注射器及過濾器。配制前需對原液瓶口進行碘伏消毒,分裝容器需經(jīng)121℃高壓滅菌處理,配制后需做無菌試驗驗證。
4、濃度校準法:
采用紫外分光光度計測定蛋白含量,通過標準曲線校正實際濃度。每批次配制需同步檢測陽性對照品,吸光度差值應(yīng)保持在0.02-0.05之間,超出范圍需重新調(diào)整稀釋比例。
5、分裝保存法:
配制完成的皮試液需立即分裝至棕色安瓿瓶,充氮密封后標注配制日期。儲存于2-8℃冰箱避光保存,使用前需檢查有無沉淀或變色,有效期為配制后4周。
配制過程中需穿戴無菌手套及口罩,工作臺面每日用75%酒精消毒。使用前需將冷藏皮試液恢復(fù)至室溫,避免劇烈震蕩產(chǎn)生氣泡。廢棄安瓿瓶需經(jīng)高壓滅菌處理,操作人員應(yīng)定期接受結(jié)核病篩查。建議在專業(yè)醫(yī)療機構(gòu)由經(jīng)過培訓(xùn)的檢驗人員操作,配制記錄需完整保存?zhèn)洳椤?/p>